DNA CpG 甲基化檢測
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英文描述
一：簡介
DNA甲基化是一種表觀遺傳修飾，它在在甲基轉(zhuǎn)移酶的催化下，DNA的CG兩個核苷酸的胞嘧啶被選擇性地添加甲基基團的化學修飾現(xiàn)象。DNA的甲基化會抑制基因的表達，DNA的甲基化對維持染色體的結(jié)構(gòu)、X染色體的失活、基因印記和腫瘤的發(fā)生發(fā)展都起重要的作用。主要應用于基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控機制的研究、很多疾病的診斷和治療。
二：服務介紹
常用的檢測方法：
1、MSP法
基因組DNA經(jīng)亞硫酸鈉修飾處理后，設計針對甲基化和非甲基化序列的引物進行PCR擴增，通過電泳檢測甲基化狀態(tài)。
服務內(nèi)容：
（1）基因組DNA的Bisulfite轉(zhuǎn)化；
（2）DNA甲基化檢測—基于MSP（Methylation Specific PCR）法。
我們提供：
（1）剩余的Bisulfite處理的基因組DNA；
（2）實驗報告(包括MSP產(chǎn)物的電泳圖片)。
2、BSP法:
基因組DNA經(jīng)亞硫酸鈉修飾處理后，設計BSP引物擴增目的片段，然后將PCR產(chǎn)物進行TA克隆，最后測序，判斷CpG位點是否發(fā)生甲基化。
服務內(nèi)容
（1）基因組DNA的Bisulfite轉(zhuǎn)化；
（2）BSP（Bisulfite Sequencing PCR）法，克隆測序。
我們提供
（1）剩余的Bisulfite處理的基因組DNA；
（2）實驗報告(包括BSP產(chǎn)物的電泳圖片，測序的峰圖)。
3、HRM法：
基因組DNA經(jīng)亞硫酸鈉修飾處理后，在非CpG島位置設計一對針對經(jīng)亞硫酸氫鈉處理后DNA 鏈的引物，這對引物中間包含有意義的甲基化CpG島，一旦這些CpG島發(fā)生甲基化，胞嘧啶（C）不發(fā)生變化，而未甲基化的胞嘧啶（C）轉(zhuǎn)變成胸腺嘧啶（T），樣品中的 GC 含量發(fā)生了變化，最終被轉(zhuǎn)化成了熔解曲線 Tm 值之間的差異。
