
Northern Blot
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英文描述
一:技術(shù)簡介
RNA印跡雜交(Northern blot )是一種通過檢測RNA的表達(dá)水平來檢測基因表達(dá)的方法,通過northern blot的方法可以檢測到細(xì)胞在生長發(fā)育特定階段或者脅迫或病理環(huán)境下特定基因表達(dá)情況。
Northern blot 首先通過電泳的方法將不同的RNA分子依據(jù)其分子量大小加以區(qū)分,然后通過與特定基因互補(bǔ)配對的探針雜交來檢測目的片段。“Northern blot”這一術(shù)語實(shí)際指的是RNA分子從膠上轉(zhuǎn)移到膜上的過程,當(dāng)然它現(xiàn)在通指整個實(shí)驗(yàn)的過程。Northern blot 在1977年由斯坦福大學(xué)James Alwine,David Kemp和George Stark發(fā)明。Northern blotting實(shí)際上依照比它更早發(fā)明的一項(xiàng)雜交技術(shù)Southern blot(依據(jù)生物學(xué)家 EdwinSouthern 名字來命名)來命名,Southern blot主要用來對DNA進(jìn)行分析。
Northern blot 可用來檢測不同組織、器官;生物體不同發(fā)育階段以及脅迫環(huán)境或病理?xiàng)l件下特定基因的表達(dá)樣式。如northern blot被大量用于檢測癌細(xì)胞中原癌基因表達(dá)量的升高及抑癌基因表達(dá)量的下降,器官移植過程中由于免疫排斥反應(yīng)造成某些基因表達(dá)量的上升,Northern blot還可用來檢測目的基因是否具有可變剪切產(chǎn)物或者重復(fù)序列。